大鼠子宮成纖維細(xì)胞

基本屬性：

細(xì)胞名稱：大鼠子宮成纖維細(xì)胞 

組織來(lái)源：子宮組織

商品貨號(hào)：LZ-YX9553

種屬來(lái)源：大鼠

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠子宮成纖維細(xì)胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí)，可以引起子宮脫垂。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的子宮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。子宮成纖維細(xì)胞的主要特征：①是子宮的重要細(xì)胞組成，在體外易于培養(yǎng)；②在子宮損傷后能修復(fù)和重塑子宮；③在子宮炎癥時(shí)能有效控制炎癥擴(kuò)散。

培養(yǎng)基：含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液：0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

使用方法：

大鼠子宮成纖維細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈成纖維細(xì)胞樣，在技術(shù)部標(biāo) 準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。          

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml完全培養(yǎng)基(補(bǔ)加1%FBS，促進(jìn)貼壁)重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；

4)待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

原代細(xì)胞試用的實(shí)驗(yàn)類型：

上海前面我們了解了原代細(xì)胞獲取和培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)該注意的一些細(xì)節(jié)，這有助于我們培養(yǎng)我們的原代細(xì)胞。那么原代細(xì)胞培養(yǎng)好后，它可適用哪些研究呢？

原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究，如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學(xué)研究等，還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門(mén)的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。在這些應(yīng)用中幾乎都涉及了幾個(gè)常見(jiàn)的且基礎(chǔ)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，如下：

一、細(xì)胞增殖檢測(cè)：

大鼠子宮成纖維規(guī)格常見(jiàn)檢測(cè)方法：CCK8檢測(cè)法 ，MTT檢測(cè)法，Brdu檢測(cè)法，Edu檢測(cè)法，平板克隆形成

二、細(xì)胞周期檢測(cè)

大鼠子宮成纖維品牌常見(jiàn)檢測(cè)方法：流式檢測(cè)細(xì)胞周期，標(biāo)記有絲分裂百分率法

三、細(xì)胞凋亡檢測(cè)

常見(jiàn)檢測(cè)方法：流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡，線粒體膜電位，活性氧檢測(cè)，Hoechst染色，電鏡，TUNEL

四、細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力檢測(cè)

常見(jiàn)檢測(cè)方法：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)，Transwell實(shí)驗(yàn)，Invasion實(shí)驗(yàn)

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠高敏狀腺原酸(u-T3)ELISA試劑盒 ，英文名： u-T3 ELISA Kit

大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 96T/48T

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小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 96T/48T

人肝素結(jié)合EGF樣生長(zhǎng)因子(HBEGF)試劑盒 Human HBEGF ELISA Kit

Rathiston-H2bELISAKit大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Bosc23包裝細(xì)胞克隆選擇培養(yǎng)基500毫升

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DKK1重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, His 標(biāo)簽) Protein

p38 MAPK/MKK3/MAPKK14 原活化蛋白激酶p38(抗原 0.5mgp38 MAPK/MKK3/MAPKK14 原活化蛋白激酶p38(抗原)

NETO1重組人 NETO1 / BTCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CRABP1 Protein Human 重組人 CRABP1 / RBP5 蛋白

FGFR2 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR2 / CD332 蛋白 (His 標(biāo)簽)

大鼠子宮成纖維細(xì)胞p38 MAPK/MKK3/MAPKK14 原活化蛋白激酶p38(抗原 0.5mgp38 MAPK/MKK3/MAPKK14 原活化蛋白激酶p38(抗原)

CRABP1 Protein Human 重組人 CRABP1 / RBP5 蛋白

DKK1重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, His 標(biāo)簽) Protein

FGFR2 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR2 / CD332 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NETO1重組人 NETO1 / BTCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

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  大鼠離子化鈣結(jié)合適配分子1(IBA1)單克隆抗體

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  綿羊腫瘤壞死因子α(TNFa)單克隆抗體

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  豬堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF2)單克隆抗體

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