供應(yīng)商 | 上海篤瑪生物科技有限公司 店鋪 |
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認(rèn)證 | |
報(bào)價(jià) | 人民幣 2400.00元每盒 |
關(guān)鍵詞 | 可定制,人ELISA試劑盒,酶聯(lián)試劑盒,90分鐘一步法 |
所在地 | 上海市寶山區(qū)河曲路118號(hào)6981室 |
綿羊髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 特強(qiáng)
ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
1、要移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。有人員進(jìn)行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的后,要更換槍頭。即使是吸取品時(shí)。
3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更。
4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
5、用槍吸取時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
6、吸取時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,誤差。
7、將加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi),可使槍頭上的液滴和孔壁,液滴會(huì)自然流下去。
8、全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
9、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
10、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上拍干。
11、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
12、底物是光的,要在臨用前現(xiàn)配。
13、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之10分鐘以上。
14、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免。
15、待檢樣品要澄清,否則會(huì)影響結(jié)果。
16、溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
17、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
18、對(duì)結(jié)果有疑問的樣品要用其它進(jìn)行確證。
做好對(duì)照
正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特反應(yīng),可采用羊、兔或BSA等封閉。
ELISA法是診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、病及非傳染病等方面的診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定,而且也可用于測定中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,
ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理.ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理是建立在抗原與學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上的,同時(shí)結(jié)合了酶的催化作用。其基本原理包括三個(gè)方面:1.抗原或能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其學(xué)活性。2.抗原或可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其學(xué)和酶學(xué)活性。3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。ELISA法一方面是建立在抗原與學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上,因而具有特。而另一方面又由于酶標(biāo)記抗原或是酶分子與抗原或分子的結(jié)合物,它可以催化底物分子發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生放大作用,正因?yàn)榇朔N放大作用而使本法具有很高的性。因此,ELISA法是一種既又特異的。
綿羊髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 特強(qiáng)
實(shí)驗(yàn)條件的選擇
在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多可作為固相載體,如聚氯、聚、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。常用的是40孔聚凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被(或抗原)的選擇:將(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記工作濃度的選擇:用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
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主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA檢測試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑
上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的生物企業(yè)。 總部位于上海,并在全國設(shè)有經(jīng)銷或代理機(jī)構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,擁有的研發(fā)和質(zhì)量檢測團(tuán)隊(duì)以及的倉儲(chǔ)和物流系統(tǒng)?!昂V瑪生物”已經(jīng)得到全國科研工作者的認(rèn)可,成為廣大經(jīng)銷商推崇的品牌。 公司擁有一批的研發(fā)人員,我們專注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新。產(chǎn)品覆蓋面廣,品質(zhì)可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時(shí),提供各種常規(guī)生化試劑,庫存常備產(chǎn)品多達(dá)10000多種,可隨時(shí)為廣大科研工作者提供各類試劑。在質(zhì)量方面,謹(jǐn)記公司信念:質(zhì)量一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳a(chǎn)流程,科學(xué)的質(zhì)量檢測方法和成熟的質(zhì)量檢測程序,我們恪守對(duì)每一位用戶的承諾:用的態(tài)度做的品牌。同時(shí),公司組建了一支的技術(shù)服務(wù)隊(duì)伍,能夠?yàn)榭蒲泄ぷ髡咛峁┑募夹g(shù)服務(wù)。每一位購買篤瑪生物產(chǎn)品的用戶都能夠得到的咨詢和完善的售后服務(wù)。
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